細胞凍存技術作為一種保存細胞的有效方法,在生物學領域已有深入廣泛的應用。因為正常情況下,直接冷凍細胞會產生冰晶對細胞造成傷害,從而導致細胞死亡。所以需要通過添加冷凍保護劑配制
埃澤思細胞凍存液,來保護細胞。
現在細胞凍存所使用的細胞凍存液都是經過嚴格的配制之后才可以使用的,凍存液的配制方法可以說是很多相關教學中必學的內容之一,不過還是有很多的實驗人員在配制的時候會容易出現一些比例不調的現象產生,那么,這凍存液怎么配?使用的時候應該注意什么呢?
埃澤思細胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現用現配。除了這個方式,還可選擇20%的DMSO機上80%的小牛血清,配成兩倍的儲存液,在使用時細胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環境中保存。
使用埃澤思細胞凍存液需要注意以下幾點:
1、在使用凍存液前,需要確保凍存液已經*融化,并要輕輕的混勻。對融化后的凍存液要置于4℃的環境中保存。
2、使用凍存液之前應該確保凍存前的細胞生長情況比較良好,比如說細胞需要處于對數生長期,并且凍存的時候存活率大于90%。
3、在使用細胞凍存液期間,為了保證可以發出揮理想的效果,建議將細胞凍存在液氮之中,這樣可以長時間的進行保存。如果說將細胞置于-80℃的環境下保存,那么保存的時間大約為1年。
4、凍存液如果需要做標記的話,要使用耐受有機溶劑的馬克筆進行標記,以防被酒精或異丙醇等擦掉,不能辨識。
需要注意的是,埃澤思細胞凍存液只對于專業人員的科學研究所使用,切記不可用于臨床診斷或者進行治療,更不得用于食品或藥品,不能夠存放于普通的住宅內。在使用凍存液期間,為了安全健康,應該穿著實驗服并戴一次性手套進行專業操作。